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貨源介紹

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　　中文名稱(chēng)：大腸埃希氏菌C3000

　　拉丁名稱(chēng)：Escherichia coli

　　模式菌株：否

　　其它保藏中心編號(hào)：=ATCC 15597

　　來(lái)源歷史：←中國(guó)食品藥品檢定研究院

　　收藏時(shí)間：2021/8/13

　　原始編號(hào)：C-3000

　　特征特性：菌體短桿狀，單個(gè)或成對(duì)排列，革蘭氏陰性，無(wú)芽胞。

　　參考用途：噬菌體宿主

　　生物危害程度：四類(lèi)

　　致病對(duì)象：無(wú)

　　分離基物：來(lái)源于大腸埃希氏菌K12

　　培養(yǎng)基編號(hào)：

　　培養(yǎng)基名稱(chēng)：營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂

　　培養(yǎng)基成分：蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1.0L，pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4?H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。推薦使用商品化成品培養(yǎng)基。

　　培養(yǎng)溫度：36℃

　　需氧類(lèi)型：好氧

　　注意事項(xiàng)

　　1）凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，準(zhǔn)備1支含有5-10ml液體培養(yǎng)基的試管和2個(gè)平板；用酒精燈灼燒頂部后迅速滴上無(wú)菌水使之破裂，隨后用鑷子敲碎；吸取0.5ml液體培養(yǎng)基打入凍干管充分溶解后重新打回液體試管中混勻；吸取0.2ml菌懸液打入平板涂布混勻，重復(fù)2次獲得2個(gè)平板；將液體試管和平板全部置于培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長(zhǎng)，這時(shí)需較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間；若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)；如有不明白之處，請(qǐng)務(wù)必先咨詢(xún)我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；2）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；3）菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；4）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為2-25年；

　　5）菌種使用過(guò)程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降或者不活等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏胶?個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；

　　6）打管操作需由專(zhuān)業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類(lèi)的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。

　　7）西林瓶開(kāi)封：用75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜內(nèi)使用尖嘴鉗去除塑料蓋及鋁蓋，注意不要同時(shí)打開(kāi)膠塞。緩慢開(kāi)啟膠塞，用75%酒精棉消毒瓶口部分，使用無(wú)菌吸管注入0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基復(fù)溶凍干粉末。

　　8）安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò)75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開(kāi)口處在火焰上過(guò)一遍，并保持在火焰旁操作。

　　9）甘油管使用：使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。